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柠檬书坊 -天文学 -全新正版图书 分子生物学与细胞生物学基础实验教程 孙群 中国林业出版社 9787503857744 青岛新华书店旗舰店

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全新正版图书 分子生物学与细胞生物学基础实验教程 孙群 中国林业出版社 9787503857744 青岛新华书店旗舰店书籍详细信息

  • ISBN：9787503857744
  • 作者：暂无作者
  • 出版社：暂无出版社
  • 出版时间：2010-01
  • 页数：暂无页数
  • 价格：8.00
  • 纸张：胶版纸
  • 装帧：平装-胶订
  • 开本：16开
  • 语言：未知
  • 丛书：暂无丛书
  • TAG：暂无
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内容简介：

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书籍目录：

第一部分 分子生物学实验

实验的总体设计和实验l3程安排

实验一 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验二 质粒DNA的提取

实验三 质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳

实验四 DNA重组

实验五 转化后细菌菌落的快速裂解及质粒大小的检查

实验六 重组DNA的酶切鉴定

实验七 大肠杆菌中表达的GFP的超声破碎抽提

实验八 GFP血清抗体的琼脂免疫双扩散检测

实验九 非变性条件下GFP的制备电泳

实验十 GFP血清抗体的快速亲和纯化

实验十一 免疫印迹

实验十二 GST的亲和纯化与纯化过程的SDS．PAGE分析

实验考勤及完成情况登记表

第二部分 细胞生物学实验

四膜虫简介

实验一 四膜虫的计数

实验二 一些化学试剂对四膜虫影响的观察

实验三 四膜虫吞噬的观察及酸性磷酸酶染色

实验四 福尔根染色显示四膜虫细胞核DNA

实验五 四膜虫饥饿诱导后接合行为与细胞核变化的姬姆萨染色观察

实验六 四膜虫细胞核与纤毛的分离

实验七 间接免疫酶标染色显示四膜虫纤毛

实验八 牛蛙骨髓细胞染色体的制备

实验九 CH0细胞合并离心处理后中间纤维的免疫酶标染色

主要参考文献

附录一：GFP和GST血清抗体的制备

附录二：实验所需设备器材清单

作者介绍：

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出版社信息：

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书籍摘录：

本实验的设计围绕着综合两字展开。它不是由彼此孤立的、相互间缺乏内在联系的一个个实验组成的，而是把生物学研究中最常用的那些分子生物学技术，以融合蛋白的表达和免疫印迹检测为主线，按照逻辑顺序有机地揉合在一起，构成了一个前后连贯、相互呼应的整体，从而体现了实验的综合性。

　　实验包括了从质粒的提取、DNA凝胶电泳、融合蛋白的表达质粒的构建、大肠杆菌中外源蛋白的表达、分离和制备电泳、血清抗体的快速亲和纯化，直到最后用纯化的抗体行免疫印迹检测等内容。整个实验组成了一个系列，或者说一条完整的链条，一环接一环，环环相扣，不可割裂。在修完本实验课程后，同学们对分子生物学最基本、最常用的技术应该能够比较熟悉，有些甚至基本掌握了。这将为同学们今后的学作打下一个比较坚实的分子作的基础。

　　实验的基本思路，是将目前生物学研究中最常使用的一种标记蛋白——绿色荧光蛋白（GFP）的基因，与另一种经常使用的工具性分子——蛋白谷胱苷肽转移酶（GST）的基因连在一起，构建成GSI-GFP融合蛋白的表达质粒，令其在大肠杆菌中表达。之后，用经亲和纯化的GFP血清抗体做免疫印迹，检测是否有融合蛋白的表达。

　　实验分为两个部分：前一部分是核酸的作，构建GST-GFP融合蛋白的表达质粒；后一部分是蛋白的作，包括GFP的分离和制备性电泳纯化、血清抗体的快速亲和纯化和免疫印迹检测。

　　核酸部分的实验流程如图0-1所示。

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ISBN：9787503857744
出版社：暂无出版社
出版日期：2010-01
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